輝駿生物具有三年SILAC服務經驗，顧客發表在權威期刊J.Proteome Res.上的主體數據出自本公司，提供Arg和Lys的L、M、H三種同位素氨基酸。
一、SILAC概述
SILAC即細胞培養條件下穩定同位素標記技術(Stable isotope labeling with amino acids in cell culture，SILAC)，其基本原理是在細胞培養時，采用含有輕、中、重同位素型必需氨基酸的培養基進行細胞培養，用于SILAC主要的穩定同位素氨基酸是Lys和Arg, 細胞在傳代培養過程中同位素氨基酸將被細胞用于合成蛋白質，細胞經傳代培養5-6代后，細胞的所有蛋白質將被同位素標記，等量混合標記的蛋白質后經過SDS-PAGE分離和質譜分析，通過比較一級質譜圖中三個同位素型肽段的面積大小進行相對定量，同時二級譜圖對肽段進行序列測定從而鑒定蛋白質。
由于SILAC標記技術是體內標記技術，幾乎不影響細胞的功能，同時靈敏度高，因此其在蛋白質組學相關領域中得到了廣泛的應用，如比較蛋白質組學，蛋白質與蛋白質相互作用，蛋白質與DNA相互作用，蛋白質與RNA相互作用等領域。
二、與體外標記技術相比，SILAC屬于體內標記，具有以下技術優勢:
1、高通量，可同時鑒定并定量數百至數千種蛋白質；
2、定量精確，降低由于樣品制備不同而造成的實驗差異；
3、線性定量范圍廣；
4、靈敏度更高，蛋白質需要量明顯減少；
5、標記采用的是體內標記技術，更接近樣品真實狀態。
三、SIALC技術服務流程
四、SILAC技術服務內容
1、細胞同位素標記；
2、樣本制備與定量；
3、SDS-PAGE分離；
4、胰酶酶切后液相分離和質譜分析；
5、數據庫檢索；蛋白質定量分析；
6、相關生物信息學分析；
7、實驗報告提交。
五、送樣須知
1、技術咨詢：在您開始實驗之前，本公司將為您竭誠提供最有效的SILAC實驗設計方案，本公司提供Lys和Arg均為L、M 、H標記的氨基酸。
2、為了保證SILAC實驗能順利進行，樣品寄送需滿足以下要求：
基本要求：SILAC實驗僅適用于能在SILAC培養基中培養的材料，具體情形請咨詢本公司。
運輸要求：液氮或干冰保存寄送，廣州本地客戶可上門收樣。
注：樣本應避免各類污染和反復凍融。
六、實驗報告內容
1、蛋白定鑒定和SILAC定量分析結果；
2、顧客指定蛋白質對應的質譜峰圖；
3、SILAC實驗完整的實驗步驟、使用儀器、軟件檢索參數等。
七、SIALC技術服務案例
八、服務周期及收費標準： 歡迎登陸： www.fitgene.com 服務熱線 400-699-1663
十、質量承諾
1、嚴謹的SILAC實驗設計方案確保定量分析結果可靠；
2、提供客觀的SILAC實驗分析結果。 |
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