合成原理
當前化學合成多肽的方法主要有兩種,即 Fmoc 和 t Boc ;由于 Fmoc 比 tBoc 存在更多優勢,所以現在較流行的是 Fmoc 法。多肽合成是一個重復添加氨基酸的過程,合成方向是從 C 端(羧基端)向 N 端(氨基端)進行;過去多肽合成大多是在液相中進行,現在大多采用固相合成,從而大大的降低了每步產品提純的難度;為了防止副反應的發生,合成柱和添加的氨基酸的側鏈都是預先被保護的,只有羧基端是游離的,并且在反應之前必須先用化學試劑活化它。具體合成步驟如下:
1 、去保護: Fmoc 保護的柱子和單體必須用一種堿性溶劑( piperidine )去除氨基的保護基團。
2 、激活和交聯:下一個氨基酸的羧基被一種激活劑所激活溶解,激活的單體與游離的氨基在交聯劑的作用下交聯,形成肽鍵。
3 、循環:這兩步反應反復循環直到整條肽鏈合成完畢。4 、洗脫和脫保護:根據肽鏈所含的殘基不同,用不同的脫樹脂溶劑從柱上洗脫下來,其保護基團被一種脫保護劑( TFA )洗脫和脫保護。
肽鏈的設計
簡介
多肽是復雜的大分子 , 因此每條序列在物理和化學特性上都是獨特的,有些多肽合成很困難 , 另有些多肽雖然合成相對容易 , 但純化困難;*常見的問題是許多肽不溶于水溶液 , 因此在純化中 , 這些疏水肽必須溶于非水溶劑中或特殊的緩沖液 , 而這些溶劑或緩沖液很可能不適合應用于生物實驗系統 , 因此研究人員不能使用該多肽達到自己的目的 , 因此下面是對于研究人員設計多肽的一些建議。 |
|